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細胞系的細胞培養步驟,分享給大家
更新時間:2021-01-26 點擊次數:1453次
  細胞系中篩選出來細胞株的有特殊屬性的比如無線增值的。細胞株:通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株,也就是說,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。
 
  細胞系是原代細胞經傳代成功后即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續傳代的細胞叫做連續或無限,不能連續培養的稱為有限細胞系。大多數二倍體細胞為有限。由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限,可稱為有限,如可以連續培養,則稱為連續,培養50代以上并無限培養下去。人類zhongliu細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。
 
  細胞系對于生物醫學研究是非常有價值的工具。然而,它們作為正常或患病組織模型的有效性有賴于它們真的是研究人員所認為的組織類型和物種。ATCC細胞系作為體外模型而被廣泛應用于生物醫學研究。正確數據的獲得常常依賴于細胞系的特性,尤其是當它用來替代其來源者的組織時。
 
  細胞系的細胞培養步驟:
 
  一.培養基及培養凍存條件準備:
 
  1)準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
 
  2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
 
  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
 
  二.細胞系的菌種處理:
 
  1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
 
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
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