由于
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株在長(zhǎng)期的保存?zhèn)鞔^程中，受到各種不穩(wěn)定因素影響。例如細(xì)胞遺傳污染和基因變異等。故經(jīng)過一段時(shí)間之后，腫瘤細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變異，并導(dǎo)致其生物學(xué)特性的改變，從而降低腫瘤動(dòng)物模型的均一性和可比對(duì)性。因此要想保證腫瘤動(dòng)物模型的穩(wěn)定性，必須對(duì)結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。
腫瘤細(xì)胞實(shí)質(zhì)就是腫瘤。腫瘤組織由實(shí)質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成，腫瘤實(shí)質(zhì)是腫瘤細(xì)胞，是腫瘤的主要成分，具有組織來源特異性。它決定腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)以及每種腫瘤的特殊性。通常根據(jù)腫瘤的實(shí)質(zhì)形態(tài)來識(shí)別各種腫瘤的組織來源，進(jìn)行腫瘤的分類、命名、和組織學(xué)診斷，并根據(jù)其分化成熟程度和異型性大小來確定腫瘤的良惡性和腫瘤的惡性程度。腫瘤細(xì)胞有三個(gè)顯著的基本特征即：不死性，遷移性和失去接觸抑制。除此之外，腫瘤細(xì)胞還有許多不同于正常細(xì)胞的生理、生化和形態(tài)特征。
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株培養(yǎng)：
1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺(tái)內(nèi)，固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個(gè)橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側(cè)找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養(yǎng)皿中。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨，同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液，吹打混勻，取樣計(jì)數(shù)。
7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養(yǎng)瓶上。
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株復(fù)蘇步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
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