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細胞凋亡形態學檢測方法有哪些
更新時間:2022-04-23 點擊次數:1042次
  細胞主要的死亡方式有2種,包括細胞壞死和細胞凋亡,其中細胞壞死是很早就被發現的,而細胞凋亡是近年來被發現的,并且越來越被重視,最近幾年也一直是非常的熱門。
 
  這是因為,對于細胞凋亡的檢測可以用于腫瘤細胞和組織在內的不同種類病理標本研究,并且還能應用于臨床診療,新藥研制、生物制品開發、腫瘤放化療、以及從促凋亡角度探索腫瘤的基因治療,對相關疾病的早期發現、放化療的療效評價具有舉足輕重的地位。
 
  細胞凋亡是指為維持內環境穩定,生物體內細胞在特定的內源或外源信號誘導下,其死亡途徑被激活,并在有關基因的調控下發生的程序性死亡過程,是程序性死亡過程的一種主要形式,它涉及染色質凝聚和外周化、細胞質減少、核片段化、細胞質致密化、與周圍細胞中斷、內質網與細胞膜融合,終細胞片段化形成許多細胞凋亡體。
 
  形態學檢測:
 
  根據凋亡細胞固有的形態特征,人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。
 
  1 光學顯微鏡和倒置顯微鏡檢測:
 
  (1) 未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。
 
  (2) 染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
 
  2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡拍細(胞凋亡)結果:
 
  一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。
 
  3 透射電子顯微鏡觀察:
 
  結果評判:凋亡細胞體積變小,細胞質濃縮。Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的細胞核內染色質高度盤繞,出現許多稱為氣穴現象(cavitations)的空泡結構;Ⅱa期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化;晚期,細胞核裂解為碎塊,產生凋亡小體。
 
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